BOD5，屬于水體污染物的中一類比較重要的有機(jī)污染物指標(biāo)，其數(shù)值的高低直接關(guān)系到水體水質(zhì)．因此，我們應(yīng)在今后的工作中對各類水體及污染源進(jìn)行認(rèn)真、細(xì)致地調(diào)查研究，通過可靠、準(zhǔn)確、先進(jìn)的測定手段和經(jīng)過培訓(xùn)持證上崗的專業(yè)技術(shù)人員為保證，注意水質(zhì)監(jiān)測過程中各類指標(biāo)監(jiān)測結(jié)果的準(zhǔn)確性控制，做好實(shí)驗(yàn)內(nèi)及實(shí)驗(yàn)室間的質(zhì)量保證工作，BOD5實(shí)現(xiàn)監(jiān)測分析方法的標(biāo)準(zhǔn)化、逐步建立起完善的環(huán)境監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)，提供出代表性、準(zhǔn)確性、精密性、可比性及完整性的監(jiān)測數(shù)據(jù)，為科技生產(chǎn)服務(wù)、企業(yè)技術(shù)改造、清潔生產(chǎn)服務(wù)、為環(huán)境保護(hù)主管部門監(jiān)督管理服務(wù)．

1、水樣的保存與運(yùn)輸
各種水質(zhì)的水樣，從采集到分析的過程中，由于物理的、化學(xué)的和生物的作用，會發(fā)生各種變化，而影響BOD5的測定結(jié)果．因此，必須在采樣時針對水樣的不同情況和待測物的特性實(shí)施保護(hù)措施，并力求縮短運(yùn)輸時間，盡快將水樣送到實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行分析，當(dāng)待測物的濃度很低時，更要注意水樣的保存．用于分析BOD5，指標(biāo)的水樣好采用玻璃或聚乙烯容器盛裝，并在采集時充滿容器并密封，防止由于路途顛簸、水樣振蕩、與空氣接觸而加快水樣中微生物對某些可氧化物質(zhì)的分解作用．水樣的運(yùn)輸過程中應(yīng)好進(jìn)行冷藏（2—5。C暗處進(jìn)行保存），配備隔熱容器，放入致冷劑，將樣品置于其中保存，這樣也可以抑制微生物的活動，減緩物理作用和化學(xué)作用的速度，保證水樣采集時的原始狀況．水樣采集后，應(yīng)盡早進(jìn)行測定，一般應(yīng)在6h內(nèi)進(jìn)行分析，若需要遠(yuǎn)距離轉(zhuǎn)運(yùn)，在任何情況下，貯存時間不應(yīng)超過24h．在測定條件及其他因素不允許的特殊情況下，可將水樣進(jìn)行冷凍（一20。C，一般不使用），但長時間不可超過1個月．

2、稀釋水與接種稀釋水
生化需氧量的經(jīng)典測定方法，是稀釋接種法，方法適用于測定BOD，大于或等于2mg／L，大不超過6000mg／L的水樣，當(dāng)水樣BOD5大于6000mg／L時，會因稀釋帶來一定的誤差．當(dāng)水樣稀釋倍數(shù)超過100倍時，應(yīng)預(yù)先在容量瓶中用蒸餾水初步稀釋后，再取適量進(jìn)行后稀釋培養(yǎng)．因此，BOD5對稀釋水及接種稀釋水的要求就相當(dāng)嚴(yán)格，也是關(guān)系到實(shí)驗(yàn)測定成敗，影響BOD5測定結(jié)果準(zhǔn)確性的主要因素．
2．1、稀釋水
對某些地面水及大多數(shù)工業(yè)廢水，因含有較多的有機(jī)物，需要經(jīng)稀釋水稀釋后再培養(yǎng)測定，以降低其濃度和保證培養(yǎng)過程中有充足的溶解氧．
首先，在5-20L玻璃瓶內(nèi)根據(jù)水樣稀釋倍數(shù)及平行樣的要求裝入一定量的蒸餾水，控制水溫在20。C左右，然后用無油空氣壓縮機(jī)或薄膜泵，將吸人的空氣先后經(jīng)活性炭吸附管及水洗滌后，導(dǎo)入稀釋水內(nèi)曝氣2—8h．停止曝氣亦可導(dǎo)入適量純氮，使稀釋水中的溶解氧接近于飽和，保證水樣稀釋后有足夠的溶解氧．然后，瓶口蓋以兩層經(jīng)洗滌晾干的紗布，置于20℃培養(yǎng)箱中放置數(shù)小時，使水中的溶解氧含量達(dá)到8meJL左右，臨用前還應(yīng)在每升稀釋水中加入氟化鈣溶液、氯化鐵溶液、硫酸鎂溶液、磷酸鹽緩沖液各lml，并混合均勻，以保證微生物生長的需要．稀釋水的pH值應(yīng)為7．2，其BOD5應(yīng)小于0．2mg／L．這樣才能保證經(jīng)稀釋后的水樣在5天的培養(yǎng)過程中有足夠的溶解氧，并保證微生物分解水中某些可氧化物質(zhì)時有足夠的養(yǎng)分．
2．2、接種稀釋水
水樣的培養(yǎng)過程中，要有一定數(shù)量的微生物來分解水樣中的有機(jī)物，但對于不含或少含微生物的工業(yè)廢水，其中包括酸性廢水、堿性廢水、高溫廢水或經(jīng)過氯化處理的廢水，在測定BOD5，時應(yīng)進(jìn)行接種，以引入能分解廢水中有機(jī)物的微生物，當(dāng)廢水中存在著難于被一般生活污水中的微生物以正常速度降解的有機(jī)物或含有劇毒物質(zhì)時，應(yīng)將馴化后的微生物引人水樣中進(jìn)行接種．實(shí)際工作中，兩個或三個稀釋比的樣品，凡消耗溶解氧大于2mg／L，和剩余溶解氧大于l mg／L的樣品，計算結(jié)果時，應(yīng)取其平均值．因此，接種液加入的多少對BOD5實(shí)驗(yàn)測定結(jié)果準(zhǔn)確性有著舉足輕重的作用．溶解氧消耗量小于2mg／L，有兩種可能，一是稀釋倍數(shù)過大；另一種可能是微生物菌種不適應(yīng)，活性差，或含毒物質(zhì)濃度過大，這時可能出現(xiàn)在幾個稀釋比中，稀釋倍數(shù)大的消耗溶解氧反而較多的現(xiàn)象．這就要求在實(shí)踐工作中不斷總結(jié)工作經(jīng)驗(yàn)，并根據(jù)接種液中菌群數(shù)量濃度、菌群的適應(yīng)性、水樣特征來控制接種液加入量的多少，以便提高測定水樣BOD5，指標(biāo)數(shù)值的準(zhǔn)確性．

3、其他影響因素
在水樣BOD5，指標(biāo)測定過程中還存在著其他一些影響結(jié)果準(zhǔn)確性的因素．包括實(shí)驗(yàn)測定過程中所涉及的玻璃器皿應(yīng)*洗凈，先用洗滌劑浸泡清洗，然后用稀鹽酸浸泡，后依次用自來水、蒸餾水洗凈，尤其在培養(yǎng)過程中盛裝水樣的溶解氧瓶應(yīng)保證潔凈；待測水樣的pH值應(yīng)在6．5—7．5之間，若水樣的酸度或堿度過高，可用高濃度的堿或酸液進(jìn)行中和，但用量不要超過水樣體積的0．5％；從水溫較低的水域或富營養(yǎng)化的湖泊中采集的水樣，可遇到含有過飽和的溶解氧，此時應(yīng)將水樣迅速升溫至
20cc左右，在不使?jié)M瓶的情況下，充分振搖，并時時開塞放氣，以趕出過飽和的溶解氧，等等一些其他影響因素．